RAW2647细胞是一种经典的小鼠巨噬细胞系，以其易于培养和操作而广受科研工作者青睐。然而，在培养过程中，RAW2647细胞容易发生分化，导致细胞形态改变、功能下降，甚至影响实验结果的可靠性。那么，如何才能让RAW2647细胞“保持优雅”，维持其原始的形态和功能呢？本文将为您分享RAW2647细胞培养的黄金法则，助您更好地使用这一细胞系！

细胞信息

918博天堂为您提供RAW2647细胞的相关信息：

• 倍增时间：11-30小时（生长迅速，营养消耗快，T25瓶建议添加7ml完全培养基，次日观察生长速度）。
• 传代比例：1:4-6
• 培养体系：DMEM高糖（品牌：中乔新舟，货号：ZQ-100） + 10%胎牛血清（中乔新舟，货号：ZQ0500） + 1%双抗（中乔新舟，货号：CSP006）
• 细胞形态：该株巨噬细胞呈松散贴壁的纺锤形和圆形或立方形。当细胞密度较高时，细胞可能轻微脱落变圆，或堆在一起，有些细胞甚至会漂浮。漂浮的细胞依然存活，在传代时应收集并进行离心以便继续培养。
• 换液频率：每周2~3次

正确传代方法

掌握正确的传代方法是RAW2647细胞培养的关键。每一步操作需细致入微，稍有不慎可能导致细胞分化。需要注意的是，RAW2647细胞不应使用胰酶消化，因为胰酶的使用会增加细胞分化的风险。918博天堂经过十余年的经验，摸索出一种刮刀传代的方法，此方法操作简单，有助于更好地控制细胞分化率。

方法一：刮刀传代

为了更直观地学习传代步骤，我们建议您参考我们的教学视频，以便更好地掌握操作流程。

方法二：无刮刀传代

如果您没有准备刮刀，可以按以下步骤进行传代，尽量减少细胞分化：

• 细胞密度达到80%时，用手掌心拍打瓶尾部，观察细胞脱落情况。
• 拍打过程中，约50-80%的细胞会脱落，收集这些脱落细胞。
• 按照1:4-6的比例传代，并补充新鲜的完全培养基（T25瓶需添加7ml完全培养基）。
• 注意，切勿使用枪头吹打或巴氏吸管吹打，以免造成不可控的细胞分化。

RAW2647细胞培养须知

以下是918博天堂提供的培养须知：

• 细胞放入培养箱后，静置2-4小时再观察细胞贴壁情况。
• 若有少量漂浮细胞，应进行离心（1200转5分钟）收集细胞，贴壁细胞则按视频步骤进行传代处理，无刮刀时可参考“方法二”。
• 若对传代密度难以把控或操作步骤不熟悉，可以当日联系918博天堂的销售人员或技术支持人员寻求帮助。

培养注意事项

在细胞培养过程中，您还需注意以下几点：

• 传代时不需要使用胰酶，使用无菌细胞刮拭培养表面将细胞刮落，并在离心后重新悬浮接种到新的培养瓶中。
• 细胞呈松散贴壁的纺锤形和圆形或立方形。较高细胞密度时，通常会有更多的巨噬细胞（圆细胞）。
• 细胞对血清质量敏感，可能导致细胞贴壁能力变化或分化，应选用高质量的胎牛血清。
• 培养条件、运输及环境变化等因素都会影响细胞状态，因此收到细胞后需调适一段时间，请耐心培养。
• 我们强烈推荐使用918博天堂提供的细胞培养基，以减少培养过程中可能的变因。

RAW2647冻存管复苏步骤

以下是RAW2647细胞冻存管复苏的具体步骤：

1. 从液氮中取出冻存的RAW2647细胞，迅速放入37℃水浴解冻（或用干冰盒转移到实验室）。
2. 将细胞悬液转移至含预温的培养基的离心管中，轻轻混匀（使用15ml离心管，添加3ml培养基）。
3. 以1000rpm离心5分钟，弃去上清，用新鲜培养基重悬细胞（T25瓶添加7ml）。
4. 将细胞接种于培养皿中，置于37℃、5% CO₂的培养箱中进行培养。

918博天堂致力于为您提供优质的科研细胞，确保您的实验顺利进行。如有更多问题或需求，请随时联系我们！