2024年12月18日，复旦大学上海医学院蔡国响教授团队在《血液与肿瘤学杂志》（Journal of Hematology & Oncology, IF=295）上发表了题为“myCAF衍生外泌体PWAR6通过改变肿瘤微环境中的谷氨酰胺可用性和NK细胞功能加速结直肠癌肝转移”的研究论文。该研究揭秘了来自肌成纤维细胞（myCAFs）产生的外泌体LncRNA PWAR6，如何调节肿瘤微环境（TME）中的谷氨酰胺代谢，并进一步探讨了PWAR6在促进结直肠癌（CRC）肝转移方面的作用机制。同时，靶向抑制PWAR6结合FAPI治疗在临床前模型中有效减少了肝转移，为临床管理提供了良好的发展前景。汉恒生物有幸为本研究提供了三个过表达质粒HA-ubiquitin、Myc-NRF2和Flag-Keap1。

研究成果概述

首先，myCAFs增强了CRC细胞的干细胞性和促进迁移。为了探讨癌症相关成纤维细胞（CAFs）在CRC中的作用，研究者利用了GSE166555和GSE178318单细胞测序数据，发现CAFs在肝转移CRC患者（CRLM）中的比例显著高于无肝转移患者。同时，myCAFs在CRLM中的表达显著增加，而其他CAF亚群的变化不明显。myCAF评分逐渐被建立为评估RNA-seq数据中的myCAFs水平，结果显示高评分的患者在临床上多为III期和IV期，而低评分的患者中多为I期和II期。

PWAR6的功能研究

myCAF衍生的外泌体PWAR6被发现促进CRC细胞的干性和转移。研究中，研究者在细胞共培养中引入外泌体抑制剂GW4869，从而逆转了CRC细胞的迁移速率及干性，表明myCAFs通过外泌体促进CRC细胞的转移。RNA测序结果显示PWAR6在myCAF-Exo中的表达显著上调。进一步的功能实验表明，敲低PWAR6后CRC细胞的迁移和干性下降，并且体内肝转移和皮下肿瘤的数量明显减少。这些发现证实myCAF衍生的外泌体PWAR6对CRC细胞转移的促进作用。

临床意义

在临床样本中，68Ga-FAPI-正电子发射断层扫描技术（68Ga-FAPI-PET）被用于观察肿瘤转移。研究表明，在SUVmax值较高的患者中，PWAR6表达显著上升，且观察到更多的类器官形成。此外，PWAR6在CRLM患者中的表达最高，而正常组织和非转移患者的表达则相对较低。病理分析显示PWAR6的高表达与不良预后显著相关，进一步表明PWAR6在CRC的临床管理中具有重要意义。

未来的治疗靶点

基于PWAR6在CRC发展中的关键作用，研究者评估了其作为潜在治疗靶点的可能性。通过尾静脉注射靶向PWAR6的抑制剂（ASO-PWAR6），发现能显著减轻皮下肿瘤和肝转移的肿瘤负担，尤其在与FAPI联合应用时，效果更加明显。这表明PWAR6不仅是CRC的生物标志物，更是治愈的潜在靶点。

总结而言，研究揭示了myCAF来源的外泌体PWAR6在增强CRC细胞的干性、迁移及谷氨酰胺代谢中扮演的核心角色，并指出PWAR6通过与NRF2结合来阻止其泛素化，进而影响CRC细胞的转移能力。研究结果不仅丰富了我们对CRC肝转移机制的理解，还为后续研究提供了多个潜在干预点。918博天堂也为此类前沿研究提供了重要支持与合作机会，期待在生物医学领域的更多突破。